石蠟包埋組織DNA提取試劑盒-小量 |
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價(jià)格: 元(人民幣) | 產(chǎn)地:上海 |
最少起訂量:1盒 | 發(fā)貨地:上海 | |
上架時(shí)間:2017-11-03 10:19:14 | 瀏覽量:177 | |
上海億欣生物科技有限公司
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經(jīng)營(yíng)模式:批發(fā)零售 | 公司類型:私營(yíng)合伙企業(yè) | |
所屬行業(yè):化學(xué)試劑 | 主要客戶:實(shí)驗(yàn)室 病理室 研究所 | |
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聯(lián)系人:王樂(lè)樂(lè) () | 手機(jī):18016209551 |
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石蠟包埋組織DNA提取試劑盒-小量 Paraffin Embedded Tissue DNA Extraction Kit 產(chǎn)品貨號(hào):EY-TG-43-50/100/200 包裝:50T/100T/200T 石蠟包埋組織DNA提取試劑盒產(chǎn)品介紹 樣本直接提取無(wú)需二甲苯脫蠟,方便用戶。在產(chǎn)品獨(dú)有的緩沖液體系的 作用下,DNA 從石蠟包被樣本中快速釋放,吸附于高性能的固相基質(zhì),洗脫 后即可獲得高純度 DNA。提取到的核酸純度高于市場(chǎng)上的各種同類試劑盒, 可適用于多種下游應(yīng)用。 存儲(chǔ)和穩(wěn)定性 試劑盒(Proteinase K、RNaseA 除外)儲(chǔ)存在環(huán)境溫度-40℃~40℃,相 對(duì)濕度不大于 75%,無(wú)腐蝕性氣體的避光處。Proteinase K(固體)或 RNaseA (固體)長(zhǎng)期保存應(yīng)置于 2~8℃。 保質(zhì)期:12 個(gè)月。 石蠟包埋組織DNA提取試劑盒使用前準(zhǔn)備 閱讀說(shuō)明書(shū),備好必需的試劑和儀器。需自備的試劑、耗材有三氯甲 烷(氯仿)、無(wú)水乙醇、純水、PBS(10 mM,pH7.4,福爾馬林固定組 織選用)、1.5 ml 離心管等。 全部離心均室溫進(jìn)行。 若低溫導(dǎo)致溶液 UL 析出沉淀,可在 50℃左右水浴中重新溶解,搖勻 后使用。 首次使用前,向每瓶溶液 W2 中按瓶上標(biāo)簽要求加入指定量的無(wú)水乙 醇(自備),搖勻后標(biāo)記備用。每管 Proteinase K 或 RNase A 分別用 275μl 純水(自備)完全溶解。 盒中的 1.5 ml 離心管專用于收集步驟“9”的洗脫液。 石蠟包埋組織DNA提取試劑盒提取步驟 1.樣本處理 石蠟切片:取石蠟切片(5~10 μm 厚,1×1 cm2 大。5~10 張于 1.5 ml 離心管(自備)中。至步驟 石蠟塊:取刀片刮取或切成薄片的組織樣本 5~10 mg 于 1.5 ml 離心管(自 備)中,至步驟 2。 注:盡量剔除石蠟,石蠟不會(huì)影響消化但是會(huì)使消化體積過(guò)大。另外盡 量不要使用蠟塊樣品表面長(zhǎng)期暴露于空氣中的組織。 福爾馬林等固定液中的樣本:取樣本 5~10 mg,切為數(shù)塊,置于 1.5 ml 離心管(自備)中。用 PBS 重復(fù)清洗 3 次后,至步驟 2。 PBS 清洗方法(單次):向管中加入 PBS (10 mM,pH7.4)500 μl,渦旋 振蕩混勻 15 sec,最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以上)離心 1 min, 棄上液。 2.向樣本中加入溶液 UL 350 μl(樣本應(yīng)完全浸沒(méi)于溶液 UL 中,必要時(shí)可 短暫離心),80℃ 孵育 60 min,期間每 15 min 取出混勻一次。 3.取出離心管后將其冷卻至 56℃以下(室溫放置 2~ 3 min 即可),加入 Proteinase K 5μl 及 RNaseA 5 μl,渦旋振蕩混勻 15 sec。置 56℃孵育 60 min 或直至組織完全消化,期間每 5 ~10 min 混勻一次。 4. 加入三氯甲烷 350 μl,渦旋 15 sec,最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以 上)離心 5 min。取出離心管,取上層清液至 1.5 ml 離心管(自備)中, 加入清液 1.1 倍體積的無(wú)水乙醇,渦旋混勻。 注意:勿吸入上層清液下的雜質(zhì),雜質(zhì)會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。 5. 將混勻液全部移入套有收集管的 mini 離心柱中,最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以上)離心 1 min。取出離心柱后棄去收集管中廢液,將離心柱放回收集管中。 6. 向離心柱中加入 500 μl 溶液 W2,最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以上) 離心 30 sec。取出離心柱后棄去收集管中廢液,將離心柱放回。 7. 重復(fù)步驟“6”一次。 8. 最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以上)離心 2 min。 9. 將離心柱取出并放入新的 1.5 ml 離心管中。向離心柱中加入 60 ~100 μl 溶 液 TE,室溫靜置 2~3 min,最高轉(zhuǎn)速(12000 g 或 13000 rpm 以上)離心 1 min。DNA 溶液即被收集在 1.5ml 離心管中。 注:將溶液 TE 預(yù)熱至 50~60℃時(shí)使用,可提高提取效率。 【注意事項(xiàng)】 按說(shuō)明書(shū)內(nèi)容進(jìn)行操作,違規(guī)操作可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。 盒中試劑如不慎濺到皮膚或粘膜時(shí),立即用大量清水沖洗。 盒中離心柱、離心管為配套使用的一次性產(chǎn)品,不可重復(fù)使用、與其他產(chǎn) 品混用或移作它用。 如將 Proteinase K 或 RNaseA 溶解后未立即用完,應(yīng)分別按每次可能用量 分裝成小份后-20℃保存?zhèn)溆。避免反?fù)凍融造成酶活力下降。 僅用于科學(xué)研究。 |
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